这回咱们聊聊环状RNA是咋解决产业难问题的。今儿份报告整了10页干货，全是怎么打破环状RNA这道技术关卡的故事。先来看看circRNA到底强在哪儿，这玩意是个闭合成环的结构，比线性的mRNA稳定太多，不怕被核酸外切酶给降解掉，还能降低身体的免疫反应，能让治疗性蛋白长期安全地表达出来。 特别是在CAR-T治疗这块儿，它直接给传统的体外流程拆了台子，不用在外面折腾那么久、花那么多钱，在自身免疫病或者B细胞恶性肿瘤上那潜力可大了去了，现在都在临床验证呢。 不过要把这个技术做成产业还得下功夫，环化和蛋白翻译效率是第一道坎，生产和分析检测也是拦路虎。做体外环化的时候，酶法连上短链还行，但核酶剪接法虽然好但容易有免疫原性或者环化率不稳的毛病。 为了解决这个头疼事，ProBio搞了仨方案：有痕环化、定制无痕环化、即插即用无痕环化。这几种方法灵活通用，让大家挑着用。 蛋白翻译这块儿也不省心，ProBio就想办法把IRES的构象稳住了，还让编码区的翻译速度提上去了。生产的时候老碰到开环RNA这种杂质不好除的麻烦事，纯化和分析检测的法子也不太够用。 为了从根本上解决这个问题，ProBio从源头把反应条件给调好了，用了多维的纯化策略；还搭了个CGE-PA800和IPRP-HPLC结合的分析平台，能把杂质搞得清清楚楚。 咱们拿两个实际例子来看看效果咋样。一开始设计circRNA的时候，用即插即用无痕环化方案弄出来的效率和纯度都不错，后面表达蛋白的时间也比mRNA长得多。CircRNA-anti-CD19-CAR这个分子也是经过序列优化的，阳性率上去了不说，蛋白表达的周期也比线性mRNA长一大截。 ProBio现在建了一套很全的体系：序列设计、工艺优化还有质量控制都在一块儿。AI辅助模型帮着把无痕环化的概率提上去了；整合化的环化工艺把纯度这道坎给越过去了；多维度的质控体系也能精准地查出杂质。 现在平台已经从实验室转到了GMP级的大生产上了，东西长效高表达的特性没跑了；CMC的成本也能管住；还积累了不少批生产的经验。这一套标准化的范式给治疗级circRNA制品的大规模生产指了条明路，也算是推动了整个产业往前走了一大步。